马尔尼菲篮状菌(马尔尼菲蓝状菌病症状)
侵袭性真菌病的患病率及病死率呈持续上升趋势，严重威胁患者健康，早期确切诊断是改善患者预后的关键。《侵袭性真菌病实验室诊断方法临床应用专家共识》对侵袭性真菌病诊断方法的应用人群、送检要求、结果解读及临床意义进行了介绍并提出建议。关于侵袭性真菌病微生物学检查和组织病理学检查的临床应用，共识主要提出以下建议。
➤ 真菌直接镜检
怀疑真菌感染患者的支气管肺泡灌洗液（BALF）标本及无菌体液（除血液外），应做真菌直接镜检，同时做真菌培养及血清学检查。
非无菌部位标本（痰、尿、粪等），如果做真菌培养，需要在培养同时做真菌直接镜检。
真菌直接镜检敏感性不高，多次送检能提高检出率。
活检组织标本在进行组织病理和真菌培养检查的同时，应做直接压片，荧光染色后进行真菌直接显微镜检查。
➤ 真菌培养和鉴定
在送检真菌培养检查同时，应尽可能同时送检真菌直接镜检。
组织标本进行组织病理检查时，同时应进行真菌培养检查。
真菌培养所需时间长于细菌培养，一般需要7 d，特殊情况需要2~4周以上，如果怀疑双相真菌感染（马尔尼菲篮 菌、组织胞浆菌等），应同时在 28 ℃和 37 ℃两个温度下培养。
非无菌部位真菌培养阳性，存在污染菌或定植菌可能，需要对培养所获真菌进行判断，是否有临床意义（即致病 菌），需要结合真菌直接镜检、组织病理检查、患者临床表现以及真菌致病性等进行综合判断。
真菌鉴定一般需要鉴定至种或复合群（complex）水平。根据菌种类型，参考相应真菌感染诊疗指南选择抗真菌药 物治疗。少见真菌或从疑难重症患者分离到的致病真菌应做体外药敏实验，作为临床用药参考。
➤ 血清学检查
样本类型多为血清，部分检查可用于脑脊液、BALF或其他体液。
常用方法为：隐球菌荚膜多糖抗原检测（CrAg）、曲霉半乳甘露聚糖抗原检测（GM实验）和真菌1，3‑β‑D葡聚糖检 测（ G 实验）。
隐球菌荚膜多糖抗原检测用于诊断隐球菌病，脑脊液或血清抗原阳性是隐球菌病的确诊证据。
GM实验适用于怀疑侵袭性曲霉病的患者，检查血清或BALF。阳性结果是侵袭性曲霉病临床诊断证据之一。还 需要结合临床表现、其他真菌学检查以及影像学表现综合判断。
G实验可用于怀疑侵袭性真菌病（包括念珠菌病、曲霉病、肺孢子菌病等，不包括隐球菌病、毛霉病）的患者。阴性 结果排除真菌感染的意义更大。
抗体检测适用于无明显免疫抑制人群。慢性空洞性肺曲霉病可检测曲霉IgG抗体，变应性支气管肺曲霉病患者可 检测曲霉特异性 IgE 抗体。
➤ 分子生物学方法
商品化真菌分子检测方法有限，国外有念珠菌T 2 磁共振（T 2 MR）结合PCR技术检测念珠菌血症的设备。
荧光定量PCR方法在多种深部感染真菌（曲霉、肺孢子菌、念珠菌）检测中有应用前景。
二代测序不作为常规检测推荐，疑难病例可开展对无菌组织、无菌体液或BALF的二代测序。
免疫抑制人群怀疑真菌感染时，应尽可能做组织活检。
活检组织做病理学检查同时，应采集新鲜组织做组织真菌培养。
HE染色不易发现真菌成分，应做针对真菌的特殊染色：六胺银染色（GMS）或过碘酸锡夫染色（PAS）。
免疫抑制人群，不能明确感染种类时，组织病理的特殊染色需包括针对真菌的GMS或PAS；针对分枝杆菌的抗酸染色；针对 细菌的革兰染色。
怀疑双相真菌中马尔尼菲篮状菌或组织胞浆菌感染时，骨髓穿刺液可做吉姆萨染色。
以上内容摘自：中国医药教育协会真菌病专业委员会,国家皮肤与免疫疾病临床医学研究中心（北京大学第一医院）,国家血液疾病临床医学研究中心（北京大学人民医院）.侵袭性真菌病实验室诊断方法临床应用专家共识 [J] .中华内科杂志, 2022, 61(2) : 134-141.
